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    4% PFA〔多聚甲醛〕溶液配制方法

    4% PFA〔多聚甲醛〕溶液是一種常用固定劑,大量用途于細胞學、組織學還有生物化學實驗中。它通過交聯蛋白質、其他生物分子來保持樣本結構完整性。以下是配制4% PFA溶液具體步驟:

    材料準備
    1. 多聚甲醛粉末:確保選用分析純或更高純度多聚甲醛。
    2. 去離子水:用于溶解多聚甲醛。
    3. 氫氧化鈉溶液〔約0.5 M〕:作為催化劑,促進多聚甲醛解聚為甲醛。
    4. 燒杯、磁力攪拌器:用于加熱溶解。
    5. pH計:檢測最終溶液酸堿度。

    操作步驟
    1. 稱量多聚甲醛
    根據目標體積計算所需多聚甲醛質量。例如,配制1升4% PFA溶液要稱取40克多聚甲醛。

    2. 加入去離子水
    將稱好多聚甲醛放入干凈燒杯中,加入適量去離子水〔通常為總溶液體積一半左右〕,輕輕搖晃使初步分散。

    3. 加熱和攪拌
    使用磁力攪拌器緩慢加熱至6070°C,并持續攪拌直至多聚甲醛完全溶解。此時溶液應出現清澈透明狀態。

    4. 添加氫氧化鈉溶液
    于溶液接近完全溶解時,逐滴加入0.5 M氫氧化鈉溶液,以催化反應加速多聚甲醛分解為甲醛。和此同時監測溶液pH值,通??刂朴?.07.5之間。

    5. 調整總體積并定容
    當溶液達到預期濃度后,用去離子水補充至目標體積〔如1升〕,并再次攪拌均勻。

    6. 過濾和分裝
    使用0.2微米濾膜過濾去除也許存于不溶性顆粒,然后將溶液分裝保存于無菌容器內。注意避光存放,避免長時間暴露于空氣中導致失效。

    注意事項
    整個操作需于通風優良環境中進行,因為甲醛具有揮發性、刺激性氣味。
    配制過程中要控制溫度、pH值,否則也許導致溶液不穩固。
    一直儲存時建議添加少量疊氮化鈉作為防腐劑。

    通過上述步驟,即可成功配制出符合實驗需求4% PFA溶液。這種溶液于使用前還需根據具體實驗要求進一步稀釋或處理,以確保最佳效果。

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